Apa itu Media EMB Agar ?
Media EMB Agar (Eosin Methylene Blue Agar) adalah media selektif dan media diferensial, media ini selektif untuk menumbuhkan bakteri gram negatif dan pada umumnya digunakan untuk isolasi dan diferensiasi bakteri non fecal coliform dan fecal coliform. Media ini dikembangkan oleh Holt-Harris dan Teague pada tahun 1916, mereka menggunakan EMB agar untuk membedakan antara koloni bakteri yang dapat memfermentasi laktosa dengan yang tidak dapat memfermentasi laktosa. Di media EMB juga ditambahkan sukrosa untuk membedakan antara koloni bakteri coliform yang mampu memfermentasi sukrosa lebih cepat dari laktosa dengan koloni bakteri yang tidak mampu memfermentasi sukrosa.
Komposisi Media Emb Agar
| Bahan | Jumlah |
| Peptone | 10 gram |
| Lactose | 5 gram |
| Sucrose | 5 gram |
| Dipotassium phosphate | 2 gram |
| Eosin Y | 0,4 gram |
| Methylene blue | 0,065 gram |
| Distilled Water | Add to make 1 Liter |
pH akhir pada media EMB : 7,2 ± 0,2 pada suhu 25°C
Fungsi Bahan Pada Komposisi Media EMB Agar
- Pepton : untuk menyediakan nitrogen, vitamin, mineral dan asam amino esensial untuk pertumbuhan bakteri.
- Laktosa : untuk meyediakan sumber karbohidrat untuk difermentasi bakteri sehingga dapat membedakan koloni bakteri yang bisa memfermentasi laktosa dengan koloni bakteri yang tidak memfermentasi laktosa.
- Sukrosa : untuk meyediakan sumber karbohidrat untuk difermentasi bakteri sehingga dapat membedakan koloni bakteri coliform dengan koloni bakteri coliform.
- Dipotassium phosphate (K2HPO4) : untuk menyediakan elektrolit dan keseimbangan osmotik.
- Eosin Y : sebagai indikator pH serta menghambat pertumbuhan bakteri gram positif.
- Methylene blue : sebagai indikator pH serta menghambat pertumbuhan bakteri gram positif.
- Agar : untuk memadatkan media.
Cara Pembuatan Media EMB Agar
- Timbang 37,5 gram (atau sesuaikan pada botol Media EMB) bubuk Media EMB, larutkan dengan aquadest sebanyak 1 liter.
- Panaskan sampai mendidih untuk melarutkan media.
- Sterilkan dalam autoclave pada suhu 121°C selama 15 menit.
- Tunggu suhu sampai hangat-hangat kuku (45°C-50°C), homogenkan
- Tuang ke dalam cawan petri steril.
Interprestasi Hasil Media EMB Agar
- Media EMB Agar digunakan untuk menguji kualitas air untuk membedakan bakteri non fecal coliform dan fecal coliform yang menandakan kemungkinan kontaminasi mikroorganisme patogen dalam sampel air (adanya Escherichia coli di sungai / sampel air menunjukkan kemungkinan kontaminasi tinja di sungai / sampel air, begitu juga dengan adanya bakteri patogen usus lainnya).
- Bakteri gram negatif yang memfermentasi laktosa (umumnya bakteri usus) dapat menghasilkan asam, dalam kondisi asam akan menghasilkan warna kompleks berwarna ungu gelap atau warna hijau metalik. Warna hijau metalik ini merupakan indikator dari bakteri yang dapat memfermtasi laktosa dengan kuat dan/atau bakteri yang dapat memfermentasi sukrosa (khas pada bakteri coliform fecal).
- Pada bakteri yang memfermentasi laktosa dengan lambat akan menghasilkan asam dengan jumlah yang sedikit sehingga koloni akan berwarna coklat atau merah muda.
- Pada bakteri yang tidak dapat memfermentasi laktosa koloni akan berwarna merah muda atau transparan.
Koloni Escherichia coli pada media EMB agar. (sumber : http://microbeonline.com/eosin-methylene-blue-emb-agar-composition-uses-colony-characteristics/)
Referensi :
Microbe Online
Microbe Library
